Declaración Personal

El enfoque de mi investigación ha estado en: (1) caracterizar los aspectos funcionales de EspP en la inducción de macropinocitosis de la toxina Shiga, y (2) determinar los mecanismos por los cuales el colon puede regenerarse después de una lesión. Desde mi trabajo postdoctoral en el laboratorio de la Dra. Olga Kovbasnjuk, he estado trabajando para determinar los efectos fisiopatológicos de la interacción de E. coli enterohemorrágica (EHEC) con los enterocitos humanos.

Usando un modelo celular in vitro y un modelo murino in vivo, inicialmente caractericé una proteína EHEC, la serina proteasa bacteriana, EspP, como esencial en la patogenicidad de esta infección. Además, recibí capacitación en el laboratorio del Dr. Hugo de Jonge en la Universidad Erasmus (Rotterdam, NL) para establecer cultivos de organoides intestinales y colónicos humanos, no cancerosos, ex vivo, derivados de células madre adultas.

Recientemente, los validé como un modelo funcional de la fisiología intestinal humana normal y la fisiopatología infecciosa. Los datos preliminares obtenidos de los estudios de EHEC y/o el uso de enteroides han sido fundamentales para obtener varias subvenciones el año pasado (incluida una subvención U18/UH3, U01, R24 y Gates Foundation; co-PI: Donowitz, Kovbasnjuk, otros), incluyendo un K01 (PI: In).

Sobre la base de mi experiencia en investigación con herramientas moleculares y de imágenes y nuestros datos preliminares novedosos y emocionantes obtenidos sobre organoides colónicos humanos, tengo las habilidades técnicas únicas y la formación integral para tener éxito en estos estudios propuestos. Recientemente he desarrollado un protocolo técnico para usar la edición de genes CRISPR/Cas9 para crear cultivos de organoides humanos knockout estables.

Usando esta técnica, comencé a cuestionar el papel de genes específicos relacionados con células madre en la regeneración del colon y el inicio del cáncer colorrectal. En base a nuestros datos preliminares novedosos y emocionantes obtenidos en los organoides humanos editados con CRISPR, creo que estoy en una posición única para ayudar a lograr los objetivos propuestos en esta aplicación.